Univerzitet u Beogradu
Farmaceutski fakultet
Nemanja N. Dimić
ZAVRŠNI RAD
Uticaj negativne modulacije GABA
A
receptora na
lokomotornu aktivnost i timarenje pacova
Beograd, jul 2015.
II
Univerzitet u Beogradu
Farmaceutski fakultet
Nemanja N. Dimić
ZAVRŠNI RAD
Uticaj negativne modulacije GABA
A
receptora na
lokomotornu aktivnost i timarenje pacova
Beograd, jul 2015.
II
Zahvalnost
Imao sam tu sreću, a i privilegiju, da od samog početka školovanja budem u okruženju
pedagoga koji su uočili moj potencijal i usadili želju za radom u meni. Ovu priliku želim da
iskoristim i da se zahvalim svojoj dragoj vaspitačici Biserki Jović. Zahvaljujući njoj sam
zavoleo školu i učenje. Nisam ni zaboravio svoju učiteljicu Oliveru Stevanović uz čiju
pomoć sam postao predan radu i sa kojom sam napravio prve korake u matematici i ostalim
naukama. Takođe sam zahvalan svojoj razrednoj Milki Bačević koja je unela neophodnu
dozu ozbiljnosti u moj rad i napravila kod mene temelj za dalji rad i napredak.
Od samog početka studiranja imao sam privilegiju da upoznam, spletom tada nesrećnih
okolnosti, dipl. farm–med.bioh.spec. Andrijanu Milošević Georgiev koja mi je svih godina
studiranja nesebično pomagala.
Diplomski rad je urađen na Farmaceutskom fakultetu Univerziteta u Beogradu na Katedri
za farmakologiju pod rukovodstvom profesora dr. Miroslava Savića. Profesoru Saviću se
zahvaljujem što mi je omogućio da se bavim ovom tematikom, da spoznam nauku i
istraživanje , kao i na korisnim savetima tokom eksperimentalnog i teorijskog rada. Ujedno
se zahvaljujem i svim zaposlenima na Katedri za farmakologiju na pomoći tokom izrade
samog rada.
Svim svojim prijateljima se zahvaljujem na podršci i razumevanju. Neretko se dešavalo da
im zbog obeveza nisam bio na raspolaganju, a oni su uzvraćali iskrenom podrškom. Vreme
provedeno u brojnim studentskim organizacijama i samo druženje sa ljudima iz istih ću
doveka pamtiti. Imao sam i tu čast da budem u studentskom gde sam proveo verovatno i
najlepših pet godina u životu. Uživao sam potpunu podršku i imao uvek oslonac svog
prijatelja i cimera Vladimira Jašćura.
Podrška mojih roditelja, Tanje i Nebojše Dimić, se ne može opisati rečima. Sve što bih
napisao umanjilo bi značenje. Od kako znam za sebe jedini su istrajno verovali u mene,
pružali ljubav i podršku i nesebično ulagali u moj razvoj i obrazovanje uprkos svim
okolnostima koje su nas zadesile. Ovaj diplomski rad kao kruna mog dosadašnjeg rada
pripada i njima. Sam svoj diplomski rad posvećujem svojoj nedavno preminuloj baki Jelici
Dimić.
III
Sadržaj
Sažetak .................................................................................................................................. IV
Abstract .................................................................................................................................. V
1.
UVOD .......................................................................................................................... 1
2.
CILJ RADA ................................................................................................................. 5
3.
TEORIJSKI I EKSPERIMENTALNI DEO ................................................................ 6
3.1. Eksperimentalne životinje .................................................................................... 6
3.2. Korišćene supstance ............................................................................................. 7
3.3.
Bihejvioralni testovi ............................................................................................. 7
3.3.1.
Test spontane lokomotorne aktivnosti (SLA) ............................................... 8
3.4.
Statistička analiza ................................................................................................. 9
4.
REZULTATI ............................................................................................................ 10
4.1. Eksperiment 1 .................................................................................................... 10
4.1.2.
Pacovi muškog pola ................................................................................... 10
4.1.2.
Pacovi ženskog pola ................................................................................... 11
4.2. Eksperiment 2 .................................................................................................... 13
5.
DISKUSIJA .............................................................................................................. 15
5.1.
Eksperiment 1 ............................................................................................. 15
5.2.
Eksperiment 2 ............................................................................................. 16
6.
ZAKLJUČAK ........................................................................................................... 18
V
Abstract
Maternal lipopolysaccharide (LPS) exposure during pregnancy activates the innate immune
response by acting on the fetal brain, causing neurodevelopmental changes which can be
expressed later in life through variations in different behavioral parameters. The present
study aimed to investigate the role of negative modulation of α
5
GABA
А
receptor in the
control of behavior of adult rats of both sexes in LPS treated and control (SAL) group in
first experiment (FE). In second experiment (SE), we administered higher doses of the
negative modulator to normal adult male rats and estimated the potential to antagonize the
obtained effects. The test of spontaneous locomotor activity (SLA) was used to investigate
the influence of negative modulation of GABA
A
receptors on the total distance traveled
(TDT) and time in grooming (TG). In FE in the acute treatment, we used the selective
ligand PWZ-029 (2 mg/kg), as a partial inverse agonist. Two–factor ANOVA revealed no
significant difference in the TDT depending on the prenatal and acute treatment, in both
male and female rats. In male rats, there was a significant impact of both factors – LPS
group exposed to PWZ-029 had lower TG, also LPS group had lower TG than SAL group
exposed to PWZ-029. In female group there was a significant influence of prenatal
treatment on TG – LPS group which was exposed to PWZ-029 had lower TG. One–factor
ANOVA was used in interpretation of results in SE. That factor was treatment: PWZ-029 in
two doses (5 mg/kg, 15 mg/kg), and PWZ-029 in same doses but with flumazenil (15
mg/kg). Influence of treatment was significant – all of treatments have increased TDT in
comparison with control gruop. Influence of treatment on TG was not statistically
significant. This research pointed to the role of α
5
GABAА receptors in control of
grooming in rats prenatally exposed to LPS. The findings related to the application of
PWZ-029 were contrary to the expected, indicating a duality of the moduator role of α
5
subunit of GABA
A
receptor.
